Lymphoprep™-即用型PBMC分离液

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Lymphoprep™-即用型PBMC分离液

发布日期：2024-10-15

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Lymphoprep™-即用型PBMC分离液

✍ Lymphoprep™是什么？

1968 年，Arne Bøyum 博士发明了一种从人体血液中分离单核细胞的简单有效的方法1。这是一种简单快速的离心方法，利用不同细胞及密度梯度离心液之间密度的差异来分离细胞：单个核细胞(单核细胞和淋巴细胞)的浮力密度比红细胞和多形核白细胞(PMN)低。绝大多数单个核细胞的密度低于1.077克/毫升。因此，可以通过在密度为1.077 g/ml的等渗分离液中离心来分离这些细胞，红细胞和PMN可以通过分离液沉淀，同时将单个核细胞保留在样品/分离液界面。

Lymphoprep™正是基于此方法而开发的即用型单个核细胞分离液，可用于从外周血、脐带血和骨髓中分离单个核细胞，有超过45年的历史，被广泛用于文献中。作为一种高效的密度梯度离心液，Lymphoprep™与Ficoll-Paque™具有相同的密度 (如下表所示)、相似的成分，并且分离所得的细胞类型和数量几乎相同2。目前使用Ficoll-Paque™的实验室无需改变实验流程，可直接进行替换，性价比更高。

	FICOLL-PAQUE™ PLUS	FICOLL-PAQUE™ PREMIUM	Lymphoprep™
主要成分	Ficoll™ PM400(蔗糖聚合物)泛影酸钠	Ficoll™ PM400(蔗糖聚合物) 泛影酸钠	多聚糖泛影酸钠
密度	1.077 ± 0.001 g/mL	1.077 ± 0.001 g/mL	1.077±0.001 g/mL
是否即用型	√	√	√
是否无菌	√	√	√
是的检测内毒素	√	√	√
质量控制体系	×	ISO 13485	GMP标准+ ISO13485

✍ Lymphoprep™如何使用？

1. 将血液收集到含有抗凝血剂(EDTA、肝素、ACD)的试管中，或使用去除纤维蛋白的血液。

2. 通过添加等体积的0.9% 的NaCl溶液来稀释血液。

3. 在15ml离心管中，小心地将6 ml稀释后的血液置于3 ml Lymphoprep上。避免混合血液和分离液。盖上离心管盖以防止气溶胶的形成。

4. 在外摆式转子中，在室温(约20°C)下以800 x g的速度离心20分钟。如果血液已存放超过2小时，将离心时间增加到30分钟。

5. 离心后，单核细胞在样品/分离液界面形成明显的条带，如图所示。最好使用移液管从界面吸取细胞，而不移除上层。

6. 用0.9% 的NaCl溶液或培养基稀释收获的细胞以降低溶液的密度，并通过在250×g离心10分钟沉淀细胞。

注意事项：

为了获得最大产率，在分离之前，用生理盐水以1:1的比例稀释血样很重要。

单个核细胞悬浮液中红细胞的污染通常占细胞总数的3-10 %。

在强化免疫抑制治疗期间，一些未成熟的PMN可能会与淋巴细胞结合。

使用肝素抗凝的血液时，必须除去大部分血小板，以避免在细胞毒性试验中受到抑制。

Lymphoprep™订购信息：

货号	名称	规格
AXS-1114544	Lymphoprep™	1*250ml
AXS-1114545	Lymphoprep™	4*250ml
AXS-1115757	Lymphoprep™	20*250ml
AXS-1114546	Lymphoprep™	1*500ml
AXS-1114547	Lymphoprep™	6*500ml
AXS-1115758	Lymphoprep™	12*500ml

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产品	描述	货号
Lymphoprep™ Tube	预装有Lymphoprep™的离心管;符合GMP并通过ISO 13485认证 Lymphoprep Tube是一种无菌管，其中Lymphoprep位于塑料滤片下方。可将稀释的血液简单直接地加入离心管中，滤片可防止样本与分离液的混合。	AXS-1019818 AXS-1019817
Nycodenz™ (iohexol powder)	通用密度梯度分离液 Nycodenz^®是一种灰白色粉末，易溶于水。可以制备密度为1.426 g/ml的高达80%(v/w)的溶液。	AXS-1002424
OptiPrep™ (iodixanol solution)	OptiPrep™是一款理想型密度梯度分离液 OptiPrep™是一种基于碘克沙醇的无菌的，经过内毒素测试的多功能分离液。与任何其他密度梯度分离液不同，碘克沙醇(作为一种X射线成像剂)已经过临床测试，并严格按照欧盟cGMP标准生产。	AXS-1114542
Polymorphprep™	即用型人多形核细胞分离液 Polymorphprep是一种即用型无菌且经内毒素检测的溶液，用于分离人多形核白细胞(粒细胞)。	AXS-1114683
Polysucrose™ 400	多功能非离子、亲水性、水溶性粉末，可用于密度梯度分离和其他应用 Polysucrose™ 400 是一种合成的高分子量聚合物，由蔗糖和环氧氯丙烷共聚而成。分子具有支链结构，羟基含量高，在水溶液中具有良好的溶解性。该产品与GE生产的 Ficoll^® 400 相似。	AXS-1026582

参考文献：

Bøyum, A. (1968): Separation of leucocytes from blood and bone marrow. Scand J. Clin. Lab. Invest. 21, Suppl. 97.

Yeo C et al. (2009) : Ficoll-PaqueTM versus LymphoprepTM: a comparative study of two density gradient media for therapeutic bone marrow mononuclear cell preparations Regen Med. 4(5): 689–96