小鼠：选择一种品系的小鼠
DBA/1 (DBA)小鼠 或 C57BL/6 (B6)小鼠
l 7-8周小鼠
l SPF级动物房
l 高脂饮食
推荐佐剂和胶原蛋白：选择1种佐剂+ 1种胶原蛋白
货号 | 佐剂 |
| 货号 | 骨胶蛋白 |
7002 | Incomplete Freund’s Adjuvant (IFA) (DBA - Booster only) |
| 20011 | Chick Type II Collagen, Lyophilized (DBA or B6) |
7008 | Complete Freund’s Adjuvant (CFA), 1 mg/ml (DBA) |
| 20012 | Chick Type II Collagen, 2 mg/ml Solution (DBA or B6) |
7001 | Complete Freund’s Adjuvant (CFA), 4 mg/ml (DBA) |
| 20021 | Bovine Type II Collagen, Lyophilized (DBA) |
7023 | Complete Freund’s Adjuvant (CFA), 5 mg/ml (B6) |
| 20022 | Bovine Type II Collagen, 2 mg/ml Solution (DBA) |
免疫方案
方案1: 单一免疫 (DBA mice)
Day 0: 皮下注射:胶原乳剂加CFA: 4mg /ml结核分枝杆菌
Day 0 - 28: 每7天给关节炎评分
Day 28 - 56: 每2-3天给关节炎评分：关节炎发病率90 - 100%
Day 56: 实验结束。
或
方案 2: 加强免疫
Day 0: 皮下注射:含CFA的胶原乳剂:1mg /ml (DBA)或5mg /ml结核分枝杆菌(B6)
Day 0 - 28: 每7天给关节炎评分
Day 21: 皮下注射(加强剂):胶原乳剂配合IFA (DBA)或CFA：5mg /ml结核分枝杆菌(B6)
Day 28 - 56: 每2-3天给关节炎评分：关节炎发病率90 - 100% (DBA)，50-70% (B6)
Day 56: 实验结束。
用匀浆器准备乳剂：不要使用两个注射器方法
步骤*:
1. 准备材料 (图1. Homogenizer blade浆式匀浆器 (a), 带有三通旋塞的10mL注射器 (b) 和1 ml Hamilton 注射器 (c)).
2. 锁开关。
3. 保持在冰上(图2)。
4. 注射器中加入CFA。
5. 逐滴滴入等量的胶原蛋白溶液(图3)。
6. 以10,000 - 30,000 rpm混合2分钟。搅拌时，上下移动注射器。
7. 将注射器放入冰中冷却5分钟。
8. 以10,000 - 30,000 rpm混合2分钟。搅拌时，上下移动注射器。
9. 用乳滴试验评价乳剂
10. 用三通旋塞将乳剂转移到Hamilton注射器中。
乳滴聚结实验
免疫：
注射器中的乳剂 (没有气泡!) (b) 注射针 (25或27-gauge x 5/8”) (c) 限制装置
不要使用腹腔注射（IP）(a) 或 静脉注射 IV (b) 的方式注射小鼠
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